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細胞株培養對于培養液的要求及相關常識說明

原載自:th84.com[技術資料頻道]  2020-10-24  瀏覽次數:1342

   細胞株通過選擇法或克隆形成法從原代培養物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物的培養物,也就是說細胞株是用單細胞分離培養或通過篩選的方法,由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質或標志必須在整個培養期間始終存在。
  細胞株體外培養在培養液中應能滿足細胞對營養成分、促生長因子、激素、滲透壓、pH等諸多方面的要求。
  培養液pH對細胞生長的影響:
  由于大多數細胞適宜PH值為7.2-7.4,偏離此范圍對細胞將產生有害的影響。各種細胞對PH值要求也不*相同,原代細胞培養一般對PH值變動耐受差,無限細胞系耐受力強。
  總體來說,細胞耐酸性比耐堿性強一些,偏酸環境中更有利于細胞的生長。因此,配制培養用液時可把液體的PH值稍微調的偏酸一些。液體在經過0.1um或0.2um濾膜過濾時,PH值會向上浮動0.2左右。
  培養液滲透壓對細胞生長的影響:
  當細胞內、外環境的分子濃度不同時就會產生滲透壓。這種情況下,水分通過滲透流入或流出細胞,從而改變細胞的內環境。高滲透壓迫使水分從細胞中擴散出來導致細胞收縮,這種情況會使DNA和蛋白遭到破壞,細胞周期停滯以及終使細胞死亡;反之,低滲透壓使水分流入細胞內,使細胞腫脹破裂。
  培養液中谷氨酰胺的作用:
  幾乎所有的細胞對谷氨酰胺都有較高的要求。谷氨酰胺脫掉氨基后,可作為培養細胞的能量來源,參與蛋白質的合成和能量代謝。在缺少谷氨酰胺時,細胞生長不良而死亡。所以各種培養液中都含有較大量的谷氨酰胺。
  谷氨酰胺在溶液中很不穩定,應置-20℃冰凍保存,用前加入培養基中。加有谷氨酰胺的液體培養基4度冰箱儲存兩周以上時,應重新加入原來量的谷氨酰胺。

 

 

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